1.先从 9180 名澳大利亚女性参与者中，选出 6392 名提供生物样本并同意生物标志物检测的人，作为 SHOW 研究初始人群；
2.再从中筛选出 2668 名同时提供基线和第 3 年生物样本、且未使用影响性激素药物的参与者；
3.最终随机选取 451 人，又排除了无可用样本、服用影响性激素药物、结果记录错误、确诊帕金森病等情况后，395 名女性成为最终分析对象。
这些参与者中位年龄 78.1 岁（四分位距 73.7-82.3 岁），其中 76.7% 患有高血压，26% 存在肥胖问题，基本符合老年女性常见的健康状况，为研究结果的可靠性奠定了基础。
（实验流程图）
要得出科学结论，精准的检测方法和全面的评估标准必不可少，这项研究在这两方面都下足了功夫。
1. 睾酮检测：采用 “金标准” 方法
研究团队在基线和第 3 年，分别采集参与者的非空腹血液，分离血浆后，在悉尼 ANZAC 研究所采用液相色谱 - 串联质谱法（LCMS） 测定睾酮浓度。
这种方法有多靠谱？它的检测限为 35pmol/L，定量限为 90pmol/L，批内和批间变异系数分别低至 2.0% 和 3.9%-6.5%，能准确区分不同睾酮浓度，有效避免了传统免疫测定法的不精确问题，堪称睾酮检测的 “金标准”。
2. 认知功能评估：多维度覆盖关键领域
认知功能评估由专业培训人员在基线和第 3 年完成，采用综合认知测试组合，全面覆盖多个关键认知领域：
•修订版简易精神状态检查（3MS）：评估整体认知功能；
•霍普金斯言语学习测试 - 修订版（HVLT-R）：衡量即时回忆和延迟回忆能力；
•控制口语词语联想测试（COWAT）：检测执行功能和语言流畅性；
•符号数字模式测试（SDMT）：评估精神运动速度。
为了明确 “认知功能下降” 的定义，研究团队还做了验证：将第 3 年测试得分较基线降低（负分）定义为认知功能下降，同时分析了完成基线、第 3 年和第 5 年评估的亚组数据，发现第 3 年得分降低者在第 5 年仍低于基线水平，证明 3 年时的得分降低确实代表持续性认知功能负向变化。
此外，研究还收集了大量潜在混杂因素信息，包括年龄、教育程度、居住情况、吸烟、饮酒、身体质量指数，以及糖尿病、高血压、抑郁症、肾功能受损等疾病诊断情况，为后续分析提供了充分的调整依据。
（有和没有基线和第三年生物样本库样本的妇女的基本特征和差异图)
经过严谨的数据分析，研究得出了几个核心结论，有些甚至超出了预期。
1. 睾酮浓度：整体呈上升趋势，年轻老年组增幅更显著
从基线到第 3 年，395 名参与者的睾酮浓度整体居然呈上升趋势：中位值从 346.7pmol/L（四分位距 312.0pmol/L）升至 381.4pmol/L（四分位距 346.7pmol/L），平均增加 32.2pmol/L（95% 置信区间 3.31-60.9pmol/L，p=0.03）。
按年龄分组看，70-79 岁年龄组增幅最明显，平均增加 44.9pmol/L（95% 置信区间 17.3-72.6pmol/L，p<0.01）；而 80 岁及以上年龄组平均增加 12.9pmol/L（95% 置信区间 - 46.3-72.2pmol/L，p=0.67），无统计学意义。
在所有参与者中，154 人（39.0%）出现睾酮水平下降，其中 70-79 岁组有 81 人（34.2%），80 岁及以上组有 73 人（46.2%）。
（按年龄组列出的基线和随访时平均睾酮浓度图）
2. 认知功能变化：部分指标 “提升” 是假象，精神运动速度下降符合规律
3 年随访期间，参与者的即时回忆（p<0.02）和执行功能（p<0.001）测试得分显著提高，但研究人员指出，这很可能是 “测试熟悉度和练习效应” 导致的，并非实际认知功能改善；而精神运动速度测试得分显著下降（p<0.001），这符合老年人认知功能的常见变化规律。
3. 核心关联：睾酮下降与认知下降无显著关联
这是最关键的结论！在调整了年龄、身体质量指数、教育程度、抑郁症、糖尿病、高血压等潜在混杂因素后，结果显示：睾酮水平下降的女性，与睾酮水平稳定或升高的女性相比，在所有认知测试指标上，都没有表现出更高的认知功能下降风险。
具体来看各项认知指标的比值比（OR）：
•整体认知功能（3MS）：0.96（95% 置信区间 0.63-1.49，p=0.86）；
•即时回忆（HVLT-R）：0.71（95% 置信区间 0.44-1.13，p=0.151）；
•延迟回忆（HVLT-R）：1.42（95% 置信区间 0.89-2.26，p=0.14）；
•执行功能与语言流畅性（COWAT）：0.79（95% 置信区间 0.49-1.25，p=0.31）；
•精神运动速度（SDMT）：0.83（95% 置信区间 0.53-1.29，p=0.40）。
考虑到 70-79 岁年龄组是睾酮浓度增幅最大的群体，若睾酮下降对认知有不利影响，该组应最易显现。但对 237 名 70-79 岁女性的亚组分析，仍未发现两者存在关联。
